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Title: Análisis microbiológico espacio-temporal de partículas atmosféricas en la ciudad de Hermosillo, Sonora
Authors: SANTOS ROMO, ALVARO
ALMENDARIZ TAPIA, FRANCISCO JAVIER; 210491
Issue Date: Dec-2014
Publisher: SANTOS ROMO, ALVARO
Abstract: Los microorganismos dispersados por el aire tienen gran importancia biológica y económica, producen enfermedades en plantas, animales y humanos debido a que pueden ser transportados rápidamente, en forma de bioaerosoles causando alteraciones en alimentos y materiales orgánicos, además de contribuir al deterioro y corrosión del metal de monumentos y edificios. Varias enfermedades víricas, bacterianas y fúngicas del hombre y los animales son transmitidas por el aire y a menudo producen brotes epidémicos. En el presente trabajo se busca identificar el contenido de bacterias de importancia clínica asociadas a partículas finas PM10 y PST que pudieran estar relacionadas con las enfermedades respiratorias de mayor incidencia en la Ciudad de Hermosillo. Se analizaron tres Periodos de un mes (Febrero, Mayo y Agosto­ Septiembre) durante un año (2011), en cuatro sitios de muestreo en la ciudad (En el Norte en la Universidad Estatal de Sonora, Centro en el edificio de Inspección y Vigilancia del Ayuntamiento, Sur en el COBACH Villa de Seris y Noroeste en el CBTIS 206). Las partículas PM10 y PST retenidas en los filtros de los muestreadores de partículas de alto volumen se analizaron para identificar el contenido microbiológico por medio de métodos convencionales y técnicas de Biología Molecular, así como estudios de Microscopia Electrónica de Barrido (MEB) y Espectroscopia de Energía de Dispersión de Rayos X (EDS) para su análisis físico y químico. En los estudios de MEB se muestra la presencia de microorganismos asociadas a las partículas, en el análisis de EDS de las PM10 se identificaron los siguientes elementos Mg, AI, P, S, Cl, K, Ca, Fe y Sr; mientras que, en las PST, C, Mg, AI, S, Cl, Ca, Fe y Ti; de los cuales, puede alguno estar ocasionando problemas de salud en la población. Con ayuda del software Piximetre y SigmaPlot se realizó distribución de tamaño de partículas cuyo resultado muestra que aproximadamente el 65 % corresponde a partículas menores de 2.5 microm. Mediante métodos convencionales de identificación microbiana se evidencio la presencia de E. faecalis, Klebsiella pneumoniae subpneumoniae y Citrobacter sp10 principalmente, así como Pseudomonas y Enterobacterias. El contenido microbiológico asociado a las PM10 y PST también se analiza por técnicas de Biología Molecular, específicamente mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Se aplicó el protocolo del Gene Clean para la extracción del ácido desoxirribonucleico (ADN) directamente de los filtros de PM10 y PST con resultados satisfactorios. Se tomaron pequeñas porciones de los filtros obtenidos de los muestreadores de partículas, logrando extraer el ADN de los posibles microorganismos, obteniendo así valores en un intervalo de 2.53 a 30.63 ng/microl. Estos valores de concentración de ADN permitieron lograr una amplificación satisfactoria y tener éxito en la identificación de microorganismos mediante el PCR. Se aplicó el protocolo de IQ SYBR GREEN SUPER MIX y "primers" específicos para la identificación y amplificación de E. faecalis. Fueron utilizadas muestras con una cepa de E.faecalis como control positivo para la estandarización de la técnica. Se realizó un análisis de especificidad donde se incluyeron muestras de ADN de Staphilococcus aereus, Escherichia coli, Salmonella, Enterobacter aerogenes, Pseudomonas aeruginosa y como control positivo f. faecalis obteniéndose una alta especificidad. Se desarrolló un estudio de sensibilidad de la técnica donde se llevaron a cabo diluciones seriadas en donde a partir de 15 bacterias/11L se logró amplificar su ADN. Se realizó PCR de muestras de filtros con PM10 y PST obteniéndose resultados positives para f. faecalis en las cuatro estaciones, en la Sur 50%, en la Centro 66 %, en la Norte 75% y 66% en la Noroeste, de las muestras analizadas. Las técnicas tradicionales de identificación basadas en el cultivo y las características fenotípicas de las bacterias resultaron ser laboriosas en comparación con las técnicas modernas de biología molecular.
Description: Tesis de Doctorado en Ciencias de la Ingeniería
URI: http://repositorioinstitucional.uson.mx/handle/unison/6162
ISBN: 1702260
Appears in Collections:Doctorado
Tesis de Posgrado

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