Determinación de la actividad de Peptidil arginina desaminasa tipo IV (PADI4) y su relación con la actividad clínica de artritis reumatoide

Abstract

La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmune que afecta considerablemente a la población a nivel mundial, se informó que se tiene una prevalencia de 0.5 al 1.1% (Tobon y col., 2010), aunque en México se ha reportado una prevalencia nacional del 1.6 %, no debe de tomarse de manera generalizada, debido a que existen variaciones importantes dependiendo de sus regiones geográficas. Tales fluctuaciones estimadas entre el O. 77 y el 2.8% están correlacionadas con factores ambientales y genéticos (Moreno-Montoya y col., 2015; Pelaez-Ballestas y col., 2011). Los principales hallazgos clínicos de la AR son la presencia de autoanticuerpos, tales como el factor reumatoide (RF), anticuerpos contra¬proteínas citrulinadas (ACPA) o anticuerpos contra péptido cíclico citrulinado (anti-CCP) (Aletaha y col., 201 O) lo cual desencadena inflamación de las articulaciones diatroideas que conllevan a una erosión y daño progresivo del cartílago y hueso (Arend y Firestein, 2012). Aunque no existe una etiología exacta, se ha observado que tiene correlación con factores ambientales, hormonales y genéticos (Bae, 201 O), donde se han identificado numerosos locus de susceptibilidad para AR. Entre los principales genes asociados destaca el gen que codifica para la enzima peptidil arginina desaminasa tipo IV (PADl4) la cual es la responsable de la citrulinación de las proteínas tales como vimentina, fibrinógeno, fibrina (Anzilotti y col., 2010; Bax y col., 2011; Raychaudhuri, 2010). Las enzimas peptidil arginina desaminasas (PAD) forman parte de una familia de enzimas dependientes de calcio que catalizan la conversión de residuos de arginina a residuos de citrulina. En humanos, se han encontrado cinco isotipos de PAD: PADl1, PADl2, PADl3, PADl4 y PADl6·, las cuales se distribuyen en una amplia gama de células y tejidos, donde cada isotipo muestra un sitio de unión especifico. PADl1 se expresa predominantemente en la epidermis y el útero, PADl2 es el isotipo mayormente difundido, expresado en músculos esqueléticos, bazo, cerebro, glándulas secretoras, PADl3 en los folículos pilosos, mientras que PADl4 en neutrófilos y eosinófilos, mientras que PADl6 en ovarios (Arita y col., 2004; Vossenaar y col., 2003). Diversos estudios han confirmado la asociación de PADl4 en distintas poblaciones como en coreano (Kang y PAD/4 col., 2006), chino (Fan y col., 2008), américa del norte (Plenge y col., 2005) y población del occidente de México (Guzman-Guzman y col., 2015) esta última se obtuvo que el haplotipo GTG es más frecuente en AR que en controles donde además se asocia con un incremento de niveles de ACPA y de mRNA donde se demostró que la expresión fue 3 veces mayor en pacientes con AR que contienen el haplotipo susceptible, lo que coincide con lo reportado en población japonesa (Suzuki y col., 2003). Además en la población sur de México se obtuvo que el haplotipo GTG es más frecuente en AR que en controles por lo que se confirmó la asociación del haplotipo susceptible en esta población (Banos-Hernandez y col., 2017). Con base a lo anterior es importante la evaluación de la actividad de la enzima y así relacionarlo con la actividad clínica de la AR. En el presente trabajo se estandarizó el método por HPLC para la detección de PADl4, la cual posteriormente puede ser utilizada para evaluar muestras de neutrófilos de pacientes con AR.