Caracterización morfométrica de eritrocitos sanos y patológicos utilizando la microscopía de la fuerza atómica y validación de los métodos ASS, ASG Y VGW

Abstract

El volumen corpuscular medio (VCM) es un índice del tamaño promedio del eritrocito que se utiliza para el diagnóstico de anemia. Sin embargo, el VCM obtenido con un analizador de hematología puede producir valores erróneos debido a la presencia de aglutinación de glóbulos rojos (GRs) y cantidad excesiva de plaquetas grandes, por lo que es necesario realizar un examen microscópico. La Microscopia de Fuerza Atómica (AFM) posibilita el análisis simultáneo de la topografía morfométrica y mecánica de las células como indicativo de la integridad celular. En este trabajo se evaluaron las características morfométricas de los GRs de muestras sanguíneas de pacientes con microcitosis y macrocitosis. El área superficial (AS), volumen por método de Grano por Watershed (VGW), tamaño, forma, y rugosidad (Rrms) de los GRs se obtuvieron mediante el análisis topográfico por AFM. Los valores de VCM obtenidos de la biometría hemática fueron comparados con el AS y VGW de la AFM. En los resultados obtenidos pudimos identificar que el área superficial por el método de grano (ASG) es más adecuado en relación con el área superficial por el método de superficie ASS. Además, el valor de volumen celular (VGW) obtenido mediante AFM corresponde al VCM de la muestra, brindando información relacionada con el tamaño del eritrocito. Por otra parte, en el análisis de forma en la microcitosis se encontraron esferocitos, codocitos, ovalocitos; y en la macrocitosis codocitos y equinocitos. Nuestros resultados indican que la AFM es una técnica adecuada para la clasificación de anemia microcítica y macrocítica mediante la determinación del AS por el método de grano, además de proporcionar parámetros de la integridad celular nano y microscópico simultáneamente.