Implementación de la técnica de aspiración por micropipetas para la medición de propiedades mecánicas en células vivas

Abstract

En este estudio se montó un sistema experimental de aspiración con micropipetas con el propósito de medir el módulo elástico de óvulos de erizo de mar sin fecundar. Las micropipetas se fabricaron de capilares de vidrio en un estirador de alta temperatura; la forma final fue obtenida en una microforja; las micropipetas fueron montadas en un micromanipulador para ser observadas en un microscopio óptico invertido. Para poner en práctica el instrumento diseñado y fabricado, se realizaron 17 mediciones con óvulos de 6 erizos de mar. La aspiración de los óvulos se llevó a cabo aplicando una presión de succión controlable mediante un mecanismo hidráulico (presión hidrostática); la deformación de los óvulos se determinó midiendo directamente sobre las fotografías tomadas en el microscopio. Este procedimiento nos permitió determinar el módulo elástico de los óvulos estudiados. Se encontró que el módulo elástico (E) de las células aumenta en función del tiempo transcurrido a partir del momento en que se obtienen los gametos, es decir, la célula se hace más rígida, lo cual puede comprometer procesos básicos para este tipo de célula (fecundación, mitosis). Con nuestro trabajo encontramos que el promedio de E para los óvulos sin fertilizar de E. vanbrunti es de 338 ± 224.91 N/m2, 663.5±399.97 N/m2 y 2613.09±997.96 N/m2; estos valores corresponden a las tres fechas en que se hicieron los estudios (días 1, 2 y 30 después de la obtención de los gametos) cercanos a los encontrados en la literatura, E =1070 ±174 N/m2 (Mitchinson et al, 1954). El instrumento diseñado y construido servirá para posteriores investigaciones con células en el Laboratorio de Biofísica de la Universidad de Sonora.