Evaluación de la citotoxicidad de nanopartículas de plata en líneas celulares de linfoma de ratón M12.I-Ak.C3F6 y células de fibroblastos normales L-929

Abstract

Tesis de maestría en ciencia de materiales. La tecnología a nanoescala, requiere el control y la manipulación de la materia desde uno a cien nanómetros. Debido a las características de los nanomateriales y debido al uso que ya se les está dando es importante conocer el efecto que los nanomateriales tienen sobre los organismos vivos. En esta tesis se evaluó el efecto de nanopartículas (NPs) de plata, obtenidas a través de una síntesis verde, sobre la proliferación de células de linfoma de ratón M12. I-AK.C3F6 (C3F6) y células de fibroblastos normales L929, con el propósito de contribuir al conocimiento de los nanomateriales. Las NPs fueron preparadas usando el extracto de la planta Rumex hymenosepalus como agente reductor y estabilizante, y nitrato de plata 0.01 M en agua desionizada como el agente precursor, en condiciones ambientales. La proliferación celular se determinó mediante el ensayo de reducción del Bromuro de 3(4,5 dimetil-2-tiazoil)-2,5-difeniltetrazólico (MTT). Las NPs de plata fueron caracterizadas usando espectroscopia UV-Vis y microscopia electrónica de transmisión (MET). Con el fin de evitar interferencias del extracto de la planta R. hymenosepalus en la reducción del reactivo MTT, se adecuó el sistema de nanopartículas para eliminar el extracto de la muestra. Después, las nanopartículas de plata fueron esterilizadas con radiación ionizante usando una fuente de cobalto, y para evitar aglomeraciones, las nanopartículas fueron filtradas con una membrana de 0.22 micras. Las nanopartículas presentaron la banda de resonancia de plasmón alrededor de los 400 nm, tienen un diámetro promedio de 19±16 nm y presentan las estructuras cristalográficas cúbica centrada en las caras y hexagonal. Los resultados de MET muestran que las partículas coalescen, y aumentan el tamaño promedio en 5.6 nm al ser sometidas a esterilización. El efecto de las NPs de plata sobre la proliferación celular para las células de linfoma de ratón C3F6 y las células L929 de fibroblastos normales, es dependiente de la concentración; las nanopartículas de plata a la concentración de 0.6% y mayores, inhiben la proliferación celular en un 80%. Las nanopartículas de plata filtradas con una membrana de 0.22 micras inhiben la proliferación de las células C3F6 a la concentración de 1.25% y mayores. Las nanopartículas de plata filtradas inhiben la proliferación de las células L929 a la concentración de 2.5% y mayores; el efecto es dosis-dependiente. En cuanto a la manipulación de las nanopartículas, se encontró que no afecta al sistema de nanopartículas esterilizarlas con radiación ionizante, sin embargo, el añejamiento si provoca cambios en las nanopartículas. Las nanopartículas de plata tienen entonces un efecto inhibitorio en la proliferación de las células C3F6 y L929.