Obtención de B-Ficoeritrina de la microalga roja rhodosorus marinus y evaluación in vitro de su efecto en la proliferación de células de cáncer cervicouterino (HeLa)

Abstract

El cáncer de cérvix es una de las principales causas de muerte en mujeres mayores de 25 años. Anualmente, se informan 500,000 nuevos casos, así como 250,000 muertes a nivel mundial por este padecimiento. En cuanto a su tratamiento, casi la mitad de los agentes anticancerígenos de uso clínico son derivados de productos naturales. A la fecha continúa la búsqueda de compuestos naturales alternativos más efectivos para este padecimiento. Entre las moléculas con uso potencial como inhibidoras de la proliferación de células cancerosas se encuentran las ficobiliproteínas (FB), que son un grupo de proteínas que funcionan como pigmentos principales accesorios de la fotosíntesis de las algas rojas y cianobacterias. Diversas investigaciones recientes han estudiado el potencial anticancerígeno de estos compuestos naturales. Específicamente, las FB de Pseudoanabaena demostraron inhibir la proliferación en líneas de células de carcinoma cervicouterino (HeLa, CaLo), presentando una mortalidad celular del 43.5% y 88.8% respectivamente. Para estas mismas células, otra ficobiliproteína obtenida de Spirulina máxima demostró tener actividad citotóxica in vitro, con una mortalidad del 80% en células HeLa. Rhodosorus marinus es una microalga roja cosmopolita, fuente de ficoeritrina y la cual puede ser cultivada en el laboratorio y sobre la cual se han realizado algunos estudios sobre fotosíntesis y obtención de ficoeritrina, sin embargo, no se han realizado estudios acerca de las propiedades potenciales de sus FB. Esta microalga marina es cultivada en el laboratorio de Biomoléculas de la Universidad de Sonora, debido al interés biotecnológico de su proteína fluorescente. De ella se extrae y purifica ficoeritrina, por lo que representó un organismo idóneo para estudiar sus posibles efectos antiproliferativos sobre células cancerosas. Una vez purificada la ficoeritrina, se realizaron ensayos celulares con la línea celular HeLa. Después de realizar una curva de crecimiento celular utilizando diferentes concentraciones de ficoeritrina, se decidió trabajar con 10, 5 y 2.5 mg/mL de ficoeritrina en PBS liofilizada. Se encontró un efecto negativo significativo (p < 0.05) en la proliferación celular entre las células con ficoeritrina y los controles (células con medio de cultivo, PBS y Cis-Platino). Después se llevó a cabo un ensayo de Bradford, encontrando que en la solución de 10 mg/mL de ficoeritrina, solo 0.07 mg correspondían a proteína. Fue por esto que se dializó la ficoeritrina y se realizaron nuevamente ensayos de proliferación celular, con las mismas condiciones que los anteriores, pero utilizando concentraciones de 0.3125 a 5 mg/mL de ficoeritrina dializada, en las cuales no se encontró un efecto significativo (p > 0.05) sobre el crecimiento de las células. En nuestro estudio no encontramos un efecto significativo de la ficoeritrina, obtenida de Rhodosorus marinus, sobre el crecimiento de la línea celular HeLa después de ser dializada y con las concentraciones utilizadas.