Generación y caracterización parcial de líneas celulares cancerosas a partir de tejido tumoral obtenido de pacientes con cáncer de mama

Abstract

El conocimiento sobre los principales procesos biológicos asociados al cáncer de mama se ha basado en gran medida en el uso de líneas celulares de cáncer. La mayoría de esas líneas celulares se han generado a partir de tumores humanos de población caucásica, lo que limita los estudios centrados en la evaluación de las diferencias en la biología del cáncer y la respuesta o susceptibilidad de las drogas entre las poblaciones. El objetivo principal del presente estudio fue generar y caracterizar parcialmente líneas celulares a partir de tejido obtenido de mujeres mexicanas que padecen cáncer de mama. Para cumplir con ello se trabajó con cuatro pacientes diagnosticadas con carcinoma ductal infiltrante. Las muestras fueron procesadas hasta obtener una suspensión celular. Una vez obtenida la línea celular se evaluó mediante inmunohistoquímica la expresión de citoqueratina 7 y vimentina para determinar el fenotipo celular. Asimismo, se cuantificó mediante PCR en tiempo real la expresión de los microRNAs miR-145, miR-155, miR-181a y miR-205, los cuales están implicados en la oncogénesis. Por último, se evaluó mediante MTT la susceptibilidad de la línea ID014-T ante doxorrubicina, 5-fluorouracilo y CAPE. De las muestras de tejido obtenidas de las cuatro pacientes se establecieron siete cultivos celulares primarios de tejido tumoral (ID010-T, ID012-T, ID013-T e ID014-T), tejido aparentemente normal (ID013-N e ID014-N) y de un ganglio linfático involucrado (ID014-G). Las líneas tumorales ID014T e ID014-G provenientes de la misma paciente mostraron un fenotipo consistente con células de origen epitelial luminal que asimismo presentaban características de células mesenquimales, sugiriendo estar en una transición epitelial-mesenquimal, que podría estar favorecida por la baja expresión de miR-145. Adicionalmente, la línea ID014-T presentó susceptibilidad a CAPE a 200 µM. En conclusión, durante el desarrollo del presente estudio se generaron 4 líneas celulares de cáncer de mama y se inició con la caracterización fenotípica y molecular de las mismas. Estas líneas celulares generadas representan un modelo de estudio importante que nos permitirá realizar diferentes ensayos encaminados a comprender y tratar la enfermedad de una manera más personalizada tomando en cuenta nuestra gran diversidad genética.