Modificación al método absorción-elución para la determinación del sistema ABO y Rh en el laboratorio de química forense

Abstract

La biología forense involucra la identificación y comparación de seres vivos mediante el análisis de fluidos, tejidos y estructuras biológicas de las muestras forenses en la resolución de casos criminales. Una de las evidencias más importantes y más común en una escena de crimen son las manchas de sangre, que se pueden encontrar en diferentes soportes o sometidas a condiciones ambientales adversas, lo cual es importante para la resolución de aspectos relacionados con la ley (Bonnet, 1978; Gaensslen y col.,1989). En manchas de sangre seca, las células se han roto y por lo tanto, las pruebas de aglutinación directa no son factibles; sin embargo, los antígenos del sistema ABO no se desnaturalizan tan rápidamente por la sequedad y se pueden identificar en este sistema durante algún tiempo, conservando la capacidad de combinarse con anticuerpos específicos. La formación de estos complejos antígeno-anticuerpo, es la base de todos los métodos empleados en la detección de antígenos en el estroma de las células rojas, en manchas de sangre seca; es decir, el problema se reduce a poner en evidencia la presencia de los antígenos presentes en los glóbulos rojos mediante reacciones de aglutinación con antisueros específicos. La técnica de absorción-elución es actualmente la más satisfactoria para la determinación del sistema ABO en manchas de sangre seca y se reporta, que puede usarse también para el sistema Rh. Debido a esto, una de las principales necesidades del laboratorio de química forense, es realizar la misma técnica de absorción-elución utilizada para el sistema ABO, para la identificación del factor Rh, de una manera confiable y estandarizada (Franco, 2002). El presente estudio describe la identificación de los grupos sanguíneos ABO y Rh por medio de la técnica de absorción-elución, manejando diversas variantes de la técnica original, como manejo simultaneo de las muestras en refrigeración y TA en el proceso de formación del complejo Ag-Ac para el antígeno Rh (D); periodos de tiempo en refrigeración y TA de 3, 6, 9 horas; diluciones en el antisuero anti-D para Rh, pruebas realizadas periódicamente durante cuatro meses, entre otras. El análisis de dicha técnica indicó que para el sistema ABO (antígenos A y antígenos B), los resultados fueron constantes y reproducibles. Para los antígenos del sistema Rh(D), solamente en ciertos periodos se observaron resultados constantes y reproducibles; en algunas muestras, principalmente durante los primeros meses, los resultados indicaron aglutinación negativa, cuando debía ser positiva. La utilización de antisuero anti-D diluido fue descartado, debido a que no mostraron aglutinación en ninguna de las muestras. Se obtuvieron resultados de aglutinación constante durante los cuatro meses de prueba, indicándonos con esto, que las muestras siguen siendo fiables o adecuadas hasta por 4 meses según este estudio. En conclusión, el presente trabajo, demuestra que aplicando la técnica en refrigeración a 4°C, se obtienen resultados confiables y reproducibles para la identificación de los antígenos del sistema ABO y Rh. Para el sistema ABO, la identificación de los antígenos A y B, se llevó a cabo en los tres periodos de tiempo (3, 6, 9 horas). En el caso del sistema Rh, la identificación del antígeno Rh (D), se llevó a cabo, en los periodos de 6 y 9 horas. No se debe diluir el antisuero anti-D. La técnica resulto ser reproducible en muestras expuestas al medio ambiente hasta por 4 meses.