Estudio del efecto del láser infrarrojo en la variación de enfoque de un microscopio

Abstract

La precisión y la estabilidad de la posición del foco en microscopia confocal es crucial, no solo por la nitidez de la imagen, sino también para evitar actuaciones radiométricas que pueden ser mal interpretadas como variaciones de la intensidad de fluorescencia en la muestra. En esta tesis se abordará el efecto de la variación en la posición del foco de un microscopio confocal provocado por un láser infrarrojo de onda continua de 810 nm con un objetivo de 60X de inmersión en aceite. De manera general observamos que al encender o apagar el láser, la posición del foco cambia hacia valores más bajos o altos en la dirección del eje z, respectivamente. La variación máxima observada fue de 2.25 _m en un intervalo de tiempo de 600 s. La evolución temporal de la posición del foco fue ajustada por curvas exponenciales que imitan las variaciones de temperatura debidas a una fuente de calor. El análisis sugiere fuertemente que la desviación del enfoque se debe al calentamiento del aceite de inmersión. Esta tesis se divide en cinco capítulos: en el primero, Conceptos generales (cap. 1), se habla del contexto histórico de la microscopia, una introducción a las técnicas utilizadas, hipótesis y objetivos de la tesis. Después, en el Marco teórico (cap. 2) se comenta acerca de microscopia en general y el microscopio óptico, también se menciona acerca de los microscopios utilizados en los experimentos: fluorescencia y confocal, su principio físico y la explicación básica de la formación de imágenes, de igual manera se aborda el tema de láser infrarrojo como pinzas ópticas y sus aplicaciones. En los Antecedentes se explica el contexto del cual vienen los datos. En el capítulo de Materiales y Métodos (cap. 3) se explican las condiciones del experimento y conjuración de los componentes, así como el método para la obtención de los datos y el análisis que se les dio. En los Resultados y Discusión (cap. 4) se muestran los resultados obtenidos y un análisis cuantitativo y cualitativo de los experimentos realizados. Por último, en las Conclusiones (cap. 5) se mencionan una reflexión sobre la importancia de los resultados encontrados y recomendaciones para trabajos futuros.