Aplicación de nanopartículas de plata para combatir la hepatopancreatitis necrotizante (NHBP) en el camarón blanco del pacífico, Litopenaeus vannamei

Abstract

La hepatopancreatitis necrotizante, NHPB es causada por una bacteria tipo Rickettsia, Gram­ negativa, pleomórfica que afecta principalmente a los camarones en cultivo de la especie Litopenaeus vannamei. Vive intracelularmente en las células del hepatopancreas hasta ocasionar la muerte de los organismos. Se ha reconocido que la plata es un bactericida efectivo, pero la experimentación en los organismos acuáticos es escasa más aun a nivel de nanopartículas. La hipótesis de este trabajo es que la administración de nanopartículas alcanzara las células huésped actuando como bactericida en esta bacteria intracelular de camarones infectados. Para este experimento para la síntesis de nanopartículas de plata se usó AgN03 y extracto de hojas secas del te verde Camellia sinensis y del árbol de neem Azadirachta indica. El óptimo tiempo de reacción fue 120 minutes para C. sinensis y A. indica, estimado por medio de espectroscopia UV-vis a una absorbancia de 370 nm y 440 nm. Por medio de microscopia electrónica de transmisión se encontró que las nanopartículas de C. sinensis fue de 7-47 nm de diámetro y de 9- 19 nm para A. indica. La bacteria, NHPB se aisló de camarones cultivados infectados, para infectar camarones libres de dicha bacteria en laboratorio. A los 50 días post infección, los camarones fueron separados en tres lotes: los que recibieron 5 g de nanopartículas por medio de alimentación forzada, un segundo lote recibieron 35 11g y el tercero fue mantenido como control sin nanoparticulas. En el curso del tratamiento por 24 días se demostró por medio de la reacción en cadena de la polimerasa, PCR, que la bacteria estuvo presente sin importar las concentraciones administradas, y presentando daño severo y nódulos bacterianos en las células epiteliales a 5 g, con una mortalidad del 40%. Sin embargo a 35 g no se observe mortalidad y se observaron pocos nódulos bacterianos, pero persistió el daño severo en los tejidos epiteliales del hepatopáncreas. En el tratamiento con 0 g, de nanopartículas de camarones infectados existió el 41% de la mortalidad. En este experimento se concluye que las nanopartículas de plata son efectivas para disminuir la infección bacteriana; pero el daño observado en las células podría ser una combinación de la invasión de la bacteria y un efecto secundario de la presencia de las nanopartículas de plata.