Identificación de los compuestos responsables de la actividad antiproliferativa de la planta Argemone pleiacantha

Abstract

Los productos naturales han sido una fuente importante para el desarrollo de fármacos con acción anticancerígena. En el presente estudio se evaluó la actividad antiproliferativa de extractos y fracciones provenientes de la planta Argemone pleiacantha mediante el ensayo colorimétrico del MTT (bromo-3(-4,5-dimetiltiazol-2-il)-2, 5- difeniltetrazol), contra las líneas celulares cancerosas M12.C3F6 (linfoma de Abelson), HeLa (carcinoma de cérvix humano). A-549 (carcinoma de pulmón humano) y LS-180 (adenocarcinoma de colon humano). Se determinó la concentración mínima inhibitoria del 50% del crecimiento celular (IC50) para la línea celular M12.C3F6, encontrando que las fracciones de hexano y etanol presentaron un IC50 de 3.2± 1.3 y 5.5 ± 1.3, respectivamente. La fracción de hexano también mostró la mayor actividad sobre las líneas RAW, HeLa y LS-180 (IC50 =28.3 ± 4.9). Las fracciones de hexano y de etanol, mostraron baja actividad contra la línea celular normal de tejido subcutáneo (L-929) (IC50=90.5± 3.7 e IC50 = ˃200µg/mL, respectivamente). A partir de estas fracciones se separaron por cromatografía en columna dos subfracciones con actividad antiproliferativa, S22 y SE27, correspondientes a las fracciones de hexano y etanol, respectivamente. Las subfracciones activas se analizaron por medio de técnicas como infrarrojo (IR), resonancia magnética nuclear de protón (RMN 1H) y carbono (RMN 13C) y EL-MS. Dentro de los compuestos presentes en la subfracción S22 se pudo detectar al 11-triacontanol y otros compuestos de la cadena larga. Por otra parte, en la subfracción SE27 se identificó el alcaloide berberina, como compuesto mayoritario. Adicionalmente se inició con el estudio del mecanismo de acción implicado en la actividad antiproliferativa de A. pleiacantha. La introducción de la apoptosis se examinó en la línea M12.C3F6 por citrometría de flujo usando las tinciones del colorante JC-I, anexina V/yoduro de propidio e inhibidores de caspasas 3, 8 y 9. Los resultados indican que la apoptosis ejercida por S22 esta mediada por la vía dependiente de caspasas.