Comparación de los perfiles electroforéticos en doble dimensión de las proteínas de filtrado de cultivo de Mycobacterium tuberculosis de Hermosillo, Sonora

Abstract

La tuberculosis, aunque conocida desde la antigüedad, es la enfermedad infecciosa que produce más muertes por sí sola a escala mundial. Para su adecuado control epidemiológico será necesario obtener mayor información ontogénica y epigenética de las cepas micobacterianas aisladas de muestras clínicas, ya que sólo así se podrán desarrollar nuevos métodos diagnósticos, así como nuevas vacunas y fármacos antituberculosos más efectivos. En los últimos años se ha demostrado que la diversidad y heterogeneidad de las proteínas de Mycobacterium tuberculosis, la principal especie micobacteriana causante de tuberculosis humana, es superior a la de su genómica, por lo que se cree que su estudio brindará información para explicar las diferencias patogénicas entre cepas. Dentro de las técnicas para el estudio del proteoma (totalidad de proteínas expresadas por un organismo), la electroforesis de doble dimensión en gel es una de las técnicas más poderosas porque permite una alta definición del perfil de las proteínas expresadas a nivel celular y subcelular. Por lo anterior, fue esta técnica la utilizada en este trabajo para comparar el perfil proteico del filtrado de cultivo de una cepa de Mycobacterium tuberculosis aislada en Hermosillo, Sonora, con relación a la cepa de referencia H37Rv. Se encontraron 37 diferencias principales entre los patrones proteicos de la cepa clínica y la cepa de referencia de Mycobacterium tuberculosis. Entre éstas, 16 manchas peptídicas, algunas reportadas comúnmente como péptidos y/o proteínas inmunodominantes, presentaron una menor intensidad en la cepa clínica. No fue posible asociar una de las manchas observada en la electroforesis de la cepa de referencia con alguna proteína de Mycobacterium tuberculosis previamente reportada, porque esta mancha no aparece en los electroforetogramas de reportes previos nacionales ni internacionales. Por lo anterior, es recomendable la caracterización posterior de esta mancha. En la cepa clínica se observaron 13 manchas de una densidad muy superior a las generadas por las proteínas de la cepa H37Rv; cinco de las estas manchas peptídicas parecen estar relacionadas con proteínas involucradas en la división celular y la síntesis proteica. Finalmente, se observaron siete manchas que sólo aparecieron en el perfil proteico de la cepa clínica y se observó una mancha en la cepa de referencia que no apareció en la cepa clínica. La masa y punto isoeléctrico de esta última mancha, son similares a los de la proteína KatG, que está relacionada con la resistencia a isoniazida. Con los datos generados en este análisis, se puede concluir que el proteoma de la cepa clínica de Mycobacterium tuberculosis aislada en Hermosillo, Sonora, es significativamente diferente a la cepa de referencia H37Rv, por lo que es recomendable analizar las diferencias proteómicas de ambas cepas a través de la caracterización bioquímica e inmunológica de las manchas electroforéticas distintivas.