Electroformación de vesículas de fosfolípido

Abstract

El objetivo de este trabajo es caracterizar algunos aspectos del crecimiento y la formación de vesículas de dos mezclas de fosfolípidos (SOPC: SOPS) por medio del método de electroformación. Para esto hemos estudiado la cinética de este proceso, desde que los fosfolípidos son hidratados hasta que se convierten en GUV's. Los Fosfolípidos son moléculas formadas por dos cadenas hidrofóbicas unidas a un grupo fosfato. Estos se autoensamblan y dan origen a las vesículas. Existen diferentes tipos de vesículas, multilamelares y unilamelares. Entre las unilamelares tenemos a las vesículas unilamelares pequeñas o SUV; a las vesículas unilamelares largas LUV y a las vesículas que son objeto del estudio en esta tesis, las vesículas unilamelares gigantes GUV. Existen diferentes métodos para producir diferentes tipos de vesículas. En particular, el método de hidratación produce vesículas polidispersas con diferente tamaño y forma, esféricas cilíndricas y complejas agregados multilamelares de diámetros desde unas pocas micras hasta 50 micras. Las características de las estructuras dependen de los pasos en el proceso de la formación. Por otro lado, el método de electroformación produce vesículas unilamelares gigantes (GUV's). Para esto, se utiliza un campo eléctrico alterno aplicado a baja frecuencia a una película de fosfolípido hidratado. Como resultado, vesículas unilamelares se originan a partir de los electrodos. Existen en general dos tipos de electrodos en el proceso de electroformación: con alambres de platino y con portaobjetos recubiertos de indium Tin Oxide. Este método es bastante útil ya que por ejemplo podemos estudiar sus propiedades elásticas mediante micropipetas y realizar la observación directa con el microscopio óptico durante el proceso de la formación de GUVs. Esto nos permite controlar el diámetro de las vesículas con el campo eléctrico alterno. A pesar de flexibilidad del método, aún no está completamente entendido el mecanismo físico del crecimiento y formación de vesículas bajo el campo eléctrico.